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PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-08  浏览次数:2
摘 要:目的观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC)后的表达,研究其对HASMC增殖的影响,并对其作用机制作初步的探讨。方法利用pAdxsi载体系统构建携
  • 【题 名】PTEN基因重组腺病毒对人气道平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制
  • 【作 者】陈丽丽[1] 罗雅玲[1] 赖文岩[2] 徐健[3] 钟浩海[1] 张达成[1] 叶涵[1]
  • 【机 构】[1]南方医科大学南方医院呼吸内科,广东广州510515 [2]南方医科大学南方医院心内科实验室,广东广州510515 [3]南方医科大学南方医院肾移植科,广东广州510515
  • 【刊 名】《南方医科大学学报》 2009年第29卷第6期,1102-1105页
  • 【关键词】哮喘 气道平滑肌细胞 PTEN 细胞增殖 AKT
  • 【文 摘】目的观察携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC)后的表达,研究其对HASMC增殖的影响,并对其作用机制作初步的探讨。方法利用pAdxsi载体系统构建携带PTEN基因的腺病毒载体,体外转染HASMC,荧光显微镜观察Ad―PTEN的转染效率。RT-PCR及Western blotting检测PTEN在HASMC中的表达。采用MTS/PMS法检测细胞增殖.流式细胞仪测定细胞周期分布。Western blotting检测Akt及p-Akt的表达.RT-PCR检测P21mRNA的表达。结果外源性野生型PTEN基因经腺病毒介导成功转入HASMC,当感染复数MOI为100时,体外转染效率高达98%以上。Ad―PTEN感染HASMC后,能有效地引起细胞内过度表达PTEN。上调PTEN表达能显著提高G0/G1期细胞的比例,抑制细胞的增殖。上调PTEN表达能显著降低P―Akt及提高P21的表达水平。结论成功构建了过度表达PTEN的原代培养HASMC模型,该模型能有效地引起细胞内过度表达PTEN。上调PTEN表达能有效抑制HASMC的增殖,可能是通过对P13K/AKt信号通路的抑制及上调P21的表达而起作用的。
 
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