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靶向增强绿色荧光蛋白shRNA的真核表达载体构建

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-08  浏览次数:1
摘 要:目的构建针对增强绿色荧光蛋白(EGFP)的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6。方法设计并合成针对EGFP的shRNA DNA片段,退火后连接到真核表达载体pGene
  • 【题 名】靶向增强绿色荧光蛋白shRNA的真核表达载体构建
  • 【作 者】包莉
  • 【机 构】襄樊职业技术学院南校区医学院,湖北襄樊441021
  • 【刊 名】《湖北民族学院学报:医学版》 2009年第26卷第2期,4-6页,F0003页
  • 【关键词】增强绿色荧光蛋白 小发夹RNA RNA干扰 真核表达载体
  • 【文 摘】目的构建针对增强绿色荧光蛋白(EGFP)的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6。方法设计并合成针对EGFP的shRNA DNA片段,退火后连接到真核表达载体pGenesil-1上,通过测序证实载体构建成功;用脂质体将构建正确的质粒转染到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中,72 h后在荧光显微镜下观察EGFP的表达。结果测序证实针对EGFP的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6构建正确;荧光显微镜下观察转染pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6质粒的CHO细胞中,荧光明显减少。结论针对EGFP的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6能明显干扰EGFP的表达。
 
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