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日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体的构建表达与初步鉴定

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-08  浏览次数:4
摘 要:目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体,初步鉴定表达产物的活性。方法用overlap PCR法扩增双链抗体基因VH-GGGGS―VL将双链抗体基因重组入原核表达载体pBAD
  • 【题 名】日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体的构建表达与初步鉴定
  • 【作 者】朱晓娟[1,2] 许静[2] 李红[1,2] 顾春艳[1,2] 唐奇[2] 李玉华[1] 仇镇宁[2] 王祝鸣[1] 朱进[3] 冯振卿[1,2] 管晓虹[2]
  • 【机 构】[1]南京医科大学病理学系,南京210029 [2]南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室 [3]南京军区军事医学研究所
  • 【刊 名】《中国血吸虫病防治杂志》 2009年第21卷第3期,165-168页
  • 【关键词】日本血吸虫 抗独特型抗体 双链抗体 蛋白表达
  • 【文 摘】目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体,初步鉴定表达产物的活性。方法用overlap PCR法扩增双链抗体基因VH-GGGGS―VL将双链抗体基因重组入原核表达载体pBAD/gⅢ。表达质粒转化E.coli TOP10F’,左旋阿拉伯糖诱导表达。对表达产物进行分离纯化,ELISA检测纯化蛋白与血吸虫病人血清抗体的结合活性。结果测序证实双链抗体基因正确,构建了双链抗体的原核表达系统,双链抗体在细菌超声上清和沉淀内均有表达,分子量约为34kD。纯化产物经ELISA鉴定,结果表明NP30单特异性双链抗体可与血吸虫病人血清抗体特异性结合。结论构建和表达的日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体具有与亲本单抗相同的结合活性。
 
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