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CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞体外迁移实验

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-08  浏览次数:5
摘 要:构建一种高表达基质细胞衍生因子受体(CXCR4)的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),考察CXCR4对细胞定向迁移能力的影响。实验构建了pMSCV―CXCR4-IRES-GFP基因质粒,并通过逆转录病毒
  • 【题 名】CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞体外迁移实验
  • 【作 者】张悦[1,2] 欧来良[2] 程兆康[2] 贾小花[2] 高年发[1] 孔德领[2]
  • 【机 构】[1]天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室,天津300457 [2]南开大学生物活性材料教育部重点实验室,天津300071
  • 【刊 名】《生物医学工程学杂志》 2009年第26卷第3期,595-600页
  • 【关键词】间充质干细胞 基质细胞衍生因子受体 基质细胞衍生因子-1 迁移
  • 【文 摘】构建一种高表达基质细胞衍生因子受体(CXCR4)的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),考察CXCR4对细胞定向迁移能力的影响。实验构建了pMSCV―CXCR4-IRES-GFP基因质粒,并通过逆转录病毒将其转入预先培养的MSCs中。分别采用流式细胞分析仪、反转录聚合酶链反应(RT―PCR)和免疫荧光染色法检测CXCR4在MSCs中的表达,并利用Transwell方法检测基质细胞衍生因子(SDF-1)对MSCs体外定向迁移的影响。流式细胞仪分析显示,转基因MSCs表面CXCR4的阳性率为46%,绿色荧光蛋白(GFP)阳性率为57%。RT―PCR进一步证实了CXCR4的表达。细胞迁移实验结果表明,CXCR4基因修饰促进了MSCs向SDF-1的定向迁移,当SDF-1浓度为50ng/ml时,这种定向迁移能力较之对照组提高了近5倍。通过以上结果可以初步证实,MSCs表面CXCR4表达量在SD-1/CXCR4介导的细胞迁移通路中发挥着重要作用,这为进一步研究MSCs的体内迁移和归巢提供了依据。
 
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