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RNA干扰沉默酸性鞘磷脂酶1基因对人成纤维细胞凋亡的影响

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-22  浏览次数:2
摘 要:目的为研发保护女性生殖细胞的小分子干扰RNA(siRNA)类药物,以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,检测靶向凋亡关键基因酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的siRNA对HFF凋亡的抑制作用。方法设计合
  • 【题 名】RNA干扰沉默酸性鞘磷脂酶1基因对人成纤维细胞凋亡的影响
  • 【作 者】高军[1,2] 马芸[3] 张仁礼[4] 刘彩霞[4] 周灿权[1]
  • 【机 构】[1]中山大学附属第一医院生殖医学中心,广州510080 [2]中山大学附属第一医院东山院区妇产科,广州510080 [3]中山大学附属第二医院生殖中心,广州510120 [4]广东省人民医院妇产科生殖中心,广州510080
  • 【刊 名】《生殖医学杂志》 2009年第18卷第1期,38-43页
  • 【关键词】RNA干扰 小分子干扰RNA 凋亡 卵巢衰竭
  • 【文 摘】目的为研发保护女性生殖细胞的小分子干扰RNA(siRNA)类药物,以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,检测靶向凋亡关键基因酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的siRNA对HFF凋亡的抑制作用。方法设计合成三对靶向SMPDI基因的siRNA并体外转染HFF细胞,转染后48h用丝裂霉素(MMC)诱导细胞凋亡。荧光定量逆转录-聚合酶链反应(O-RT-PCR)法及免疫印迹(Western blot)检测siRNA转染后SMPD1在mRNA水平和蛋白水平的变化,Annexin V―PI双染检测细胞凋亡率。用脂质体(lipofectamine 2000)和无干扰siRNA(NT siRNA)作为对照。结果siRNA1、2、3对SMPD1基因mRNA的抑制效率分别为(67.0±9.0)%、0%、(45.0±2.1)%,以siRNA1最高,蛋白水平的抑制也呈现相同变化。siR-NA1组细胞凋亡率为15.2%,明显低于MMC组(26.3%)。结论靶向SMPD1的siRNA可以抑制人包皮成纤维细胞凋亡。
 
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  • (1) RNA干扰,小分子干扰RNA,凋亡,卵巢衰竭
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