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NT―3基因克隆与表达

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:10
摘 要:目的:探讨利用基因工程技术帽备神经营养素-3(Neurotrophin-3,NT-3)的方法。方法:根据NT-3cDNA序列设计一对引物,采用聚合酶锭反应,扩增编码人NT-3基因,通过基因重组,构建表
  • 【题 名】NT―3基因克隆与表达
  • 【作 者】陈昌杰 何蕴韶
  • 【机 构】[1]蚌埠医学院临床生化教研室,安徽蚌埠233003 [2]中山医科大学解剖学教研室,广东广州510089
  • 【刊 名】《中国临床解剖学杂志》 2002年第20卷第1期,58-60页
  • 【关键词】神经营养素-3 克隆 表达
  • 【文 摘】目的:探讨利用基因工程技术帽备神经营养素-3(Neurotrophin-3,NT-3)的方法。方法:根据NT-3cDNA序列设计一对引物,采用聚合酶锭反应,扩增编码人NT-3基因,通过基因重组,构建表达载体PBV220-NT-3,自动序列分析测定TN-3序列,将重组PBV220-NT-3转化到大肠杆菌DH5α中,温度诱导目的基因表达,透视电镜观察诱导后的工程菌,薄层凝胶扫描分析目的基因表达量,Western blot鉴定其免疫活性。结果:序列分析结果与文献报道一致;目的基因在温度诱导下表达量为25%,表达产物以包涵体形式存在于工程菌攻体两端,大小不一,Western blot阳性,结论:本实验利用基因工程技术制备NT-3是可行的,且表达量为25%,表达产物具有免疫活性。为进一步研究其生物学功能奠定基础。
 
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