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人骨形态发生蛋白―4成熟肽cDNA的克隆

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:11
摘 要:目的:克隆人骨形态发生蛋白-4完整成熟肽的基因,方法:根据Genebank人骨形态发生蛋白-4的基因序列化学合成两条引物,从人胎盘组织中提取得到总RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增
  • 【题 名】人骨形态发生蛋白―4成熟肽cDNA的克隆
  • 【作 者】李广恒 杨冠珍 等
  • 【机 构】[1]上海第二医科大学附属第九人民医院骨科,上海200011 [2]中国科学院上海生物化学研究所,上海200031
  • 【刊 名】《中国临床解剖学杂志》 2003年第21卷第1期,58-59页
  • 【关键词】骨形态发生蛋白-4 克隆 RT-PCR
  • 【文 摘】目的:克隆人骨形态发生蛋白-4完整成熟肽的基因,方法:根据Genebank人骨形态发生蛋白-4的基因序列化学合成两条引物,从人胎盘组织中提取得到总RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出长0.34kb编码人骨形态发生蛋白-4(BMP-4)成熟肽的基因序列,将所得的基因片段插入克隆载体PBluescriptⅡSK质粒中并转化大肠杆菌TG-1,取取重组质粒,酶切鉴定并测定。结果:RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳显示-长约370bp的条带,阳性克隆质粒经双酶切可切出约350bp的片段,全自动DNA测序结果表明和Genebank中的序列完全相符。结论:通过反转录聚合酶链式反应可从人胎盘组织中成功克隆出入BMP-4成熟肽基因。
 
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