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携带增强绿色荧光蛋白基因的Id2真核表达载体构建

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:10
摘 要:目的:构建大鼠Id2基因真核荧光表达载体,为骨骼肌的组织工程研究提供有效的分子工具。方法:利用RT-PCR的方法扩增出Id2全长cDNA,利用T4 DNA连接酶将载体pGEM-T和Id2 cDNA进行
  • 【题 名】携带增强绿色荧光蛋白基因的Id2真核表达载体构建
  • 【作 者】张黎声 邱小忠 余磊 秦建强 陆云涛 杨俊 欧阳钧
  • 【机 构】南方医科大学临床解剖学研究所,广东省组织构建与检测重点实验室,广州510515
  • 【刊 名】《中国临床解剖学杂志》 2005年第23卷第3期,276-277页
  • 【关键词】分化抑制因子2 构建 真核表达载体
  • 【文 摘】目的:构建大鼠Id2基因真核荧光表达载体,为骨骼肌的组织工程研究提供有效的分子工具。方法:利用RT-PCR的方法扩增出Id2全长cDNA,利用T4 DNA连接酶将载体pGEM-T和Id2 cDNA进行连接,构建克隆载体,经限制性内切酶EcoR1酶切pGEM-Id2克隆载体和pEGF-C2真核表达载体,构建出重组真核表达载体pEGFP-C2-Id2,经酶切分析、PCR鉴定及DNA测序证实cDNA片段大小和序列的正确性;并通过细胞转染技术将Id2基因导入L6成肌细胞中。结果:经酶切分析和序列测定证实pEGFP-C2-Id2含大小正确的正向Id2 cDNA片段,获取了转染外源性Id2基因的L6细胞。结论:我们成功构建了同时携带有G418筛选位点和增强绿色荧光蛋白的Id2真核表达载体?
 
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  • (1) 分化抑制因子2,构建,真核表达载体
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