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人生长分化因子-5完整成熟肽基因的克隆

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:11
摘 要:目的:克隆人生长分化因子-5(hGDF-5)完整成熟肽基因。方法:根据Genbank中hGDF-5的序列化学合成两条引物,从人胎儿软骨组织提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT―PCR)得到hG
  • 【题 名】人生长分化因子-5完整成熟肽基因的克隆
  • 【作 者】王万山 王启伟 朴仲贤 朴英杰
  • 【机 构】[1]第一军医大学解剖教研室,广州510515 [2]汕头大学医学院中心实验室,广东汕头515041
  • 【刊 名】《中国临床解剖学杂志》 2004年第22卷第1期,79-80页
  • 【关键词】生长分化因子-5 克隆
  • 【文 摘】目的:克隆人生长分化因子-5(hGDF-5)完整成熟肽基因。方法:根据Genbank中hGDF-5的序列化学合成两条引物,从人胎儿软骨组织提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT―PCR)得到hGDF-5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体pMD18-T并转化大肠杆菌DH5α,提取重组质粒,酶切鉴定并测序。结果:DNA琼脂糖凝胶电泳显示:PCR产物为一长约380bp的带,阳性克隆质粒经双酶切可切出约380bp的片段。全自动DNA测序表明与Genbank中的序列完全相符。结论:通过反转录聚合酶链式反应从人胎儿软骨组织中成功克隆出人GDF-5完整成熟肽基因,基因序列完全正确。
 
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