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新型神经营养因子TAT―BDNF生物合成及生物活性研究

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:33
摘 要:目的:合成新型神经营养因子TAT-BDNF并验证其生物活性,为进一步应用功能蛋白质治疗中枢神经损伤提供研究方法。方法:采用分子克隆方法构建带有TAT蛋白转导区序列及无信号肽序列人BDNF基因的原核表达
  • 【题 名】新型神经营养因子TAT―BDNF生物合成及生物活性研究
  • 【作 者】蒋晖 金大地 鲁凯伍 金卫林 鞠躬
  • 【机 构】[1]南方医科大学南方医院脊柱骨病科,广州510515 [2]第四军医大学神经科学研究所,西安710032
  • 【刊 名】《中国临床解剖学杂志》 2006年第24卷第3期,325-328页
  • 【关键词】蛋白转导 脑源性神经营养因子 中枢神经损伤 融合蛋白
  • 【文 摘】目的:合成新型神经营养因子TAT-BDNF并验证其生物活性,为进一步应用功能蛋白质治疗中枢神经损伤提供研究方法。方法:采用分子克隆方法构建带有TAT蛋白转导区序列及无信号肽序列人BDNF基因的原核表达载体pTAT―HA-DNF。经原核表达系统表达、纯化、复性获得纯净TAT―BDNF融合蛋白。利用体外培养的新生大鼠小脑颗粒细胞,通过双重免疫荧光细胞染色检测其蛋白转导活性;Hoechst33342染色观察TAT-BDNF对颗粒细胞谷氨酸兴奋性毒性损伤神经保护作用。结果:重组质粒能有效的通过原核表达系统表达并获得高纯度TAT-BDNF。免疫荧光细胞染色显示TAT-BDNF能快速转导入小脑颗粒细胞中,并能显著减少由谷氨酸诱导的细胞凋亡坏死的比例,改善神经元的存活状态。结论:合成的新型神经营养因子TAT-BDNF具有蛋白转导活性及神经保护作用。
 
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  • (1) 蛋白转导,脑源性神经营养因子,中枢神经损伤,融合蛋白
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