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液―质联用分析肝癌细胞HLA―A2类分子递呈的抗原肽

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:13
摘 要:目的:寻找MHCI类分子递呈的、T淋巴细胞识别的肝癌抗原肽。方法:人肝癌细胞系hHCC以枸橼酸-磷酸盐(pH3.3)液洗脱,洗脱物经粗分离,得到相对分子质量(Mr)<5000的各种多肽组分混合液;取各
  • 【题 名】液―质联用分析肝癌细胞HLA―A2类分子递呈的抗原肽
  • 【作 者】隋延仿 郭爱林 等
  • 【机 构】第四军医大学病理学教研室,西安710032
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第5期,486-489页
  • 【关键词】肝肿瘤 肿瘤抗原 HLA-A2 高效液相色谱-质谱 MHCI类分子
  • 【文 摘】目的:寻找MHCI类分子递呈的、T淋巴细胞识别的肝癌抗原肽。方法:人肝癌细胞系hHCC以枸橼酸-磷酸盐(pH3.3)液洗脱,洗脱物经粗分离,得到相对分子质量(Mr)<5000的各种多肽组分混合液;取各组分多肽分离液分别与抗原加工缺陷细胞(T2,HLA-A2)进行细胞表位重建,加入特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),^51Cr释放法测杀伤活性;选活性值高的抗原肽组分进行反相高效液相色谱-质谱(RP-HPLC-MS)检测,对活性峰手工读谱分析其一级结构;最后进行氨基酸同源性分析。结果:酸洗10^10hHCC细胞,样品蛋白质浓度2mg/ml;通过RP-HPLC-MS检测,其质谱图经手工解析,氨基酸序列为SXXVHXNEV,X=1或L;氨基酸同源性分析证明SXXVHXNEV为SLIVHLNEV,是肝细胞生长因子受体的第1075-1083肽段,第1080位点发生突变,由F变为L,由HLA-A2分子递呈。结论:细胞膜温和酸洗技术结合RP-HPLC-MS联用技术,是寻找肝癌抗原肽的有效方法,尚未见相同研究报道。发现的肝癌抗原肽SLIVHLNEV是肝细胞生长因子受体的突变物,可能具有重要生物学意义。
 
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  • (1) 肝肿瘤,肿瘤抗原,HLA-A2,高效液相色谱-质谱,MHCI类分子
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