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HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建与筛选

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:30
摘 要:目的 探讨噬菌体随机肽展示技术在筛选和鉴定病毒抗原序列研究中的应用前景。方法 用噬菌粒展示载体pCANTAB5X,构建HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库,用抗-HCV核心单独阳性的血清对该库进行4轮筛选
  • 【题 名】HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建与筛选
  • 【作 者】潘卫 戚中田 等
  • 【机 构】第二军医大学微生物学教研室,上海200433
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第4期,359-363页
  • 【关键词】噬菌体展示文库 丙型肝炎病毒 核心蛋白 病毒抗原
  • 【文 摘】目的 探讨噬菌体随机肽展示技术在筛选和鉴定病毒抗原序列研究中的应用前景。方法 用噬菌粒展示载体pCANTAB5X,构建HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库,用抗-HCV核心单独阳性的血清对该库进行4轮筛选,获得多个阳性克隆,测定和分析8个杂交阳性克隆的DNA序列。结果 构建的随机文库含1.23×10^5个不同克隆,噬菌体滴度为2×10^12TU/ml(转化单位/ml)。所测定的7个阳性序列中的6个为HCV核心蛋白序列,这些序列均含有与免疫筛选结果相似的HCV核心抗原序列,另一个为大肠杆菌nrfa基因,结论,所建的噬菌体文库有足够大的库容和较好的随机性,可以从该文库中筛选出正确的HCVC抗原序列,噬菌体展示技术完全可应用于病毒蛋白抗原序列的筛选,并具有简便、快速、准确的优点。
 
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  • (1) 噬菌体展示文库,丙型肝炎病毒,核心蛋白,病毒抗原
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