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PIP融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其与PRE特异性的结合

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:12
摘 要:目的 表达纯化PIP融合蛋白,探讨研究PIP与PRE特异性结合的方法。方法 构建GST-PTP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP,表达质粒在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-PIP融合蛋白,并用亲和
  • 【题 名】PIP融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其与PRE特异性的结合
  • 【作 者】邓庆丽 黄志明 等
  • 【机 构】[1]中山医科大学孙逸仙纪念医院医学研究中心,广州510120 [2]肿瘤科,广州510120
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第4期,355-358页
  • 【关键词】PIP融合蛋白 大肠杆菌 表达 纯化 PRE 紫外交联试验
  • 【文 摘】目的 表达纯化PIP融合蛋白,探讨研究PIP与PRE特异性结合的方法。方法 构建GST-PTP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP,表达质粒在大肠杆菌BL21中诱导表达GST-PIP融合蛋白,并用亲和层析柱加以纯化,利用这一融合蛋白通过Northwestern blot、UV-cross linking方法研究PIP与PRE的特异性结合。结果 GST-PIP融合蛋白表达质粒pGENKS-PIP在大肠杆菌BL21中成功地诱导表达了可溶性GST-PIP融合蛋白,纯化后获得了单一的GST-PIP融合蛋白,Northwestem blot和UV-crosslinkisng证实PIP与PRE特异性结合,比较两种方法,前者较后者特异性高,灵敏度低,而后者操作简便,结论 表达和获得纯化的PIP融合蛋白,PIP与PRE特异性结合。
 
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  • (1) PIP融合蛋白,大肠杆菌,表达,纯化,PRE,紫外交联试验
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