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新型戊型肝炎病毒ORF2部分基因的构建表达及表达产物的抗原性分析

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:7
摘 要:目的 对新型戊型肝炎病毒ORF2的3′端部分基因进行重组质粒构建及融合表达,并对表达蛋白进行抗原性分析。方法 用PCR方法从含有HEVORF2基因的pGEM-T载体上扩增表达片段,双酶切片与原核表
  • 【题 名】新型戊型肝炎病毒ORF2部分基因的构建表达及表达产物的抗原性分析
  • 【作 者】杨军 张华远 等
  • 【机 构】中国药品生物制品检定所,北京100050
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第2期,214-216页
  • 【关键词】戊型肝炎病毒 重组质粒 基因表达 血清学异质性
  • 【文 摘】目的 对新型戊型肝炎病毒ORF2的3′端部分基因进行重组质粒构建及融合表达,并对表达蛋白进行抗原性分析。方法 用PCR方法从含有HEVORF2基因的pGEM-T载体上扩增表达片段,双酶切片与原核表达载体pThioHisA构建重组质粒pThioHisA-T11。诱导表达后进行SDS-PAGE和免疫印迹分析。并用纯化的融合蛋白建立EIA检测方法,对40份抗-HEVIgG国家参比血清进行检测。结果 含有pThioHisA-T11重组质粒的菌株表达相对分子质量为40×10^3的可溶性融合蛋白T11,免疫印证明融合蛋白T11能与HEVIgG发生特异反应。ELA检测结果显示,阳性参顷血清符合率80%(8/10), 阴性参与血清符合率为87%(26/30),总符合率为85%。结论 表达了新型HEVORF2羧基端278氨基酸并证明有抗原活性,为今后提高HEV检出率奠定了基础。
 
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  • (1) 戊型肝炎病毒,重组质粒,基因表达,血清学异质性
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