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核酶在细胞外切割HCV核心区RNA的研究

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:10
摘 要:目的 研究核酶在细胞外切割HCV的作用。方法 设计核酶cDNA序列,构建核酶重组质粒及HCV核心区基因cDNA重组质粒。分别进行体外转录,并加入γ-^32P ATP以标记HCV RNA。将核酶
  • 【题 名】核酶在细胞外切割HCV核心区RNA的研究
  • 【作 者】丁芹 龚国忠 等
  • 【机 构】[1]徐州医学院附属医院传染科221002 [2]湖南医科大学附属第二医院肝病研究中心
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第3期,318-320页
  • 【关键词】核酶 丙型肝炎病毒 基因治疗 RNA 丙型肝炎
  • 【文 摘】目的 研究核酶在细胞外切割HCV的作用。方法 设计核酶cDNA序列,构建核酶重组质粒及HCV核心区基因cDNA重组质粒。分别进行体外转录,并加入γ-^32P ATP以标记HCV RNA。将核酶RNA、HCV核心区RNA、RNA酶抑制剂及反应缓冲液混事浊国育,以核酶RNA切割HCV RNA。通过变性聚 烯酰胺凝胶电泳及放射自显影来分析结果。结果 β-半乳糖苷酶表型筛选均可见蓝色及白色菌落生长;核酶重组质粒直接测序结果见预期要苷酸序列;HCV重组质粒限制笥酶切分析见410bp条带。核酶切割反应显示:反应时间为15和30min时可见453、307、146nt3条带。反应时间为60min时仅见307及146nt2条带。结论 核酶重组质粒构建成功,所设计核酶对HCV有切割作用。
 
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  • (1) 核酶,丙型肝炎病毒,基因治疗,RNA,丙型肝炎
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