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乙肝病毒核心启动子部分缺失对其活性及X蛋白转式激活作用的影响

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:8
摘 要:目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)20/21bp缺失(nt1748/1747-nt1767)的核心启动子(CP)的活性及CP部分缺失对X蛋白转式激活作用的影响。方法:将HBV CPnt601-1860
  • 【题 名】乙肝病毒核心启动子部分缺失对其活性及X蛋白转式激活作用的影响
  • 【作 者】彭Jie 骆抗先 等
  • 【机 构】第一军医大学南方医院感染内科,广州510515
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2002年第22卷第3期,266-268页
  • 【关键词】X蛋白 转式激活作用 乙型肝炎病毒 核心启动子 缺失变异 表达载体
  • 【文 摘】目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)20/21bp缺失(nt1748/1747-nt1767)的核心启动子(CP)的活性及CP部分缺失对X蛋白转式激活作用的影响。方法:将HBV CPnt601-1860区段克隆到氯霉素乙酰转移酶(CAT)报告基因表达载体(pCAT3-Basic)上,构建重组pCAT3质粒(20d-pCAT3、21d-pCAT3、wt-pCAT3)转染HepG2细胞以检测CP活性。将wt-pCAT3与野毒株型或CP 20/21bp部分缺失的含1.2拷贝HBV全基因重组质粒(P3.8I、20d-P3.8I、21d-P3.8I)共转染HepG2细胞以检测X蛋白的转式激活作用。ELISA方法检测CAT表达量。结果:PCR扩增和双酶切初步筛选的克隆株,经测序最终鉴定重组质粒克隆成功。重组pCAT3质粒转染HepG2细胞表明,CP缺失的重组表达载体(20d-pCAT3、21d-pCAT3)较野毒株型CP的重组表达载体(wt-pCAT3)产生的CAT量明显下降,均仅为后者的14.2%;共转染试验表明, wt-pCAT3可被P3.8I产生的完整X蛋白转式激活,而分别不能或仅能较弱地被共转染的20d-P3.8I、21d-P3.8I 产生的截短的X蛋白所改变。结论:HBV 20/21bp缺失的CP活性较野毒株型CP活性显著下降;CP20/21bp缺失株的X蛋白难以发挥转式激活作用。
 
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  • (1) X蛋白,转式激活作用,乙型肝炎病毒,核心启动子,缺失变异,表达载体
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