当前位置: 首页 » 资料 » 健康论文 » 重组人IL―6D24―PE40外毒素融合蛋白的构建及其生物学效应

重组人IL―6D24―PE40外毒素融合蛋白的构建及其生物学效应

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:6
摘 要:目的 构建重组人白细胞介素6-绿脓杆菌外毒素融合蛋白IL-6D24-PE40,以选择性杀伤高表达IL-6受体(IL-6R)的肿瘤细胞和白血病细胞。方法 采用重叠延伸的基因融合技术将N-末端缺失24
  • 【题 名】重组人IL―6D24―PE40外毒素融合蛋白的构建及其生物学效应
  • 【作 者】郑黎燕 奚永志 等
  • 【机 构】军事医学科学院附属医院免疫学研究室,北京100039
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第1期,95-98页
  • 【关键词】重组细胞因子-毒素融合蛋白 IL-6-PE40 基因克隆 生物学效应
  • 【文 摘】目的 构建重组人白细胞介素6-绿脓杆菌外毒素融合蛋白IL-6D24-PE40,以选择性杀伤高表达IL-6受体(IL-6R)的肿瘤细胞和白血病细胞。方法 采用重叠延伸的基因融合技术将N-末端缺失24个氨基酸的重组人白细胞介素6(IL-6D24)cDNA与缺失细胞结合区的绿脓杆菌外毒素PE40基因进行融合,构建IL-6D24-PE40融合基因。利用HB101/pBV220表达系统,实现了IL-6D24-PE40融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达,经MonoQ柱进行层析纯化,采用MTS法检测细胞毒活性。结果 IL-6D24-PE40融合蛋白在大肠杆菌中的表达水平达到40%-60%。包涵体蛋白经分离、复性及纯化得到纯度>95%的融合蛋白。Western blot证明,纯化的融合蛋白与IL-6抗体及PEA抗体均发生特异性结合。细胞毒活性检测证实,IL-6D24-PE40融合蛋白能高度特异地选择性杀伤高表达IL-6R的U937细胞,ID50约为250ng/ml,而对不表达IL-6R的CEM细胞无杀伤作用。结论 IL-6D24-PE40融合蛋白能够选择性杀伤高表达IL-6R的靶细胞,有希望成为导向治疗高表达IL-6/IL-6R系统的某些白血病和其他肿瘤的新型导向药物。
 
本文导航:
  • (1) 重组细胞因子-毒素融合蛋白,IL-6-PE40,基因克隆,生物学效应
  • 下一篇:鳖甲
  • 上一篇:暂无
 
[ 资料搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]

 

 
推荐图文
推荐资料
热门关注