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放线菌素D/TNF―α诱导大鼠肝干细胞凋亡及HGF的拮抗作用

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:0
摘 要:目的 研究TNF-α、肝细胞生长因子(HGF)在肝干细胞的增殖、分化调控及凋亡中的作用。方法 用大鼠肝干细胞系WB F-344细胞进行实验,用MTT法检测细胞毒作用;用DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细
  • 【题 名】放线菌素D/TNF―α诱导大鼠肝干细胞凋亡及HGF的拮抗作用
  • 【作 者】姚鹏 詹轶群 许望翔 李长燕 杨晓明 胡大荣
  • 【机 构】[1]第三军医大学博士生 [2]军事医学科学院放射研究所 [3]北京军区总医院肝病研究所
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2003年第23卷第5期,350-354页
  • 【关键词】肝损伤 肝干细胞 细胞凋亡 放线菌素D 肿瘤坏死因子-α 肝细胞生长因子
  • 【文 摘】目的 研究TNF-α、肝细胞生长因子(HGF)在肝干细胞的增殖、分化调控及凋亡中的作用。方法 用大鼠肝干细胞系WB F-344细胞进行实验,用MTT法检测细胞毒作用;用DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western blot方法检测磷酸化MAPK及PI3K蛋白的表达。结果 发现TNF-α单独对WB F-344细胞无明显作用;而TNF-α对放线菌素D(ActD)致敏的WB F-344细胞有明显细胞毒作用。进一步,发现TNF-α能够诱导ActD致敏的WB F-344细胞发生凋亡,在作用9h即出现细胞凋亡(13.60%),48h达高峰(51%),并且这种凋亡呈剂量效应关系。我们还发现,HGF可以明显拮抗ActD/TNF-α诱导的WB F-344细胞凋亡,并且呈剂量效应关系。Western blot结果显示,HGF刺激后,磷酸化MAPK蛋白高表达,表明HGF激活了MAPK途径。我们进一步用PI3K特异的抑制剂WT阻断PI3K途径,发现HGF的抗凋亡作用被阻断;然而,用MAPK特异抑制剂U0126阻断MAPK途径后,却并不影响HGF的抗凋亡作用。结论 TNF-α能诱导ActD致敏的肝干细胞发生凋亡,而HGF则对这种细胞凋亡有明显的拮抗作用;虽然HGF能够激活PI3K及MAPK 2条途径,但其抗凋亡作用是由PI3K途径传导的。
 
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