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应用随机多肽文库测定BAC5单抗相关的抗原表位

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:11
摘 要:目的 鉴定能被BAC5单抗识别的定位于鼻咽癌细胞表面的抗原表位。方法 应用BAC5单抗作为靶抗体对噬菌体展示的随机12肽文库进行3轮生物淘洗,用抗体捕获和竞争试验的夹心ELISA方法选择和鉴定阳性噬菌
  • 【题 名】应用随机多肽文库测定BAC5单抗相关的抗原表位
  • 【作 者】肖锡宾 张如华
  • 【机 构】[1]中山医科大学肿瘤医院中心实验室 [2]肿瘤研究所
  • 【刊 名】《中华微生物学和免疫学杂志》 2001年第21卷第4期,442-445页
  • 【关键词】抗原表位 随机多肽文库 单克隆抗体 鼻咽肿瘤 鼻咽癌
  • 【文 摘】目的 鉴定能被BAC5单抗识别的定位于鼻咽癌细胞表面的抗原表位。方法 应用BAC5单抗作为靶抗体对噬菌体展示的随机12肽文库进行3轮生物淘洗,用抗体捕获和竞争试验的夹心ELISA方法选择和鉴定阳性噬菌体克隆,对阳性和阴性噬菌体的外源性DNA片段进行序列分析,推导和比较由这些噬菌体所展示的多肽的氨基酸序列,结果 通过3轮生物淘洗能被抗体捕获的噬菌体克隆为77%(35/45),用竞争试验从所捕获的克隆中测得8个阳性克隆,来自这8个克隆的噬菌体展示3种外源多肽,即-H-Q-S-H-Y-P-V-V-S-L-(4/8),-Q-N-Q-A-W-F-S-Q-P-P-V-R-M-(3/8)和-T-Q-A-Y-K-G-F-P-V-L-P-S-(1/8),与来自阴性克隆的多肽序列-N-H-Q-S-T-F-W-Q-K-W-T-A-(6/6)比较,前3个序列在靠近肽的N端都具有相同的脯氨酸(P)和缬氨酸(V)结构(-P-V-)。结论 BAC5单抗能识别近N端含有脯氨酸和缬氨酸结构的多肽。这些多肽可能模拟存在于鼻咽癌细胞表面,与BAC5单抗相关的抗原表位的构象。
 
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