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水流动力学注射介导的IL-12基因在小鼠体内的高效表达

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:2
摘 要:目的:评估水流动力学注射法转移表达小鼠白细胞介素12(mIL-12)质粒pCMV-mIL-12的有效性,以及质粒DNA重复注射后转基因的表达情况.方法:通过小鼠尾静脉大体积快速注射pCMV-mIL-1
  • 【题 名】水流动力学注射介导的IL-12基因在小鼠体内的高效表达
  • 【作 者】李晓敏 李艳茹 张海英 王健君 王琳
  • 【机 构】吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林大学基础医学院病理学教研室,长春,130021 吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林大学基础医学院病理学教研室,长春,130021 吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林大学基础医学院病理学教研室,长春,130021 吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林大学基础医学院病理学教研室,长春,130021 吉林大学病理生物学教育部重点实验室,吉林大学基础医学院病理学教研室,长春,130021
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2007年第12期,1064-1068页,1070页
  • 【关键词】水流动力学注射 质粒DNA 白细胞介素12 基因转移
  • 【文 摘】目的:评估水流动力学注射法转移表达小鼠白细胞介素12(mIL-12)质粒pCMV-mIL-12的有效性,以及质粒DNA重复注射后转基因的表达情况.方法:通过小鼠尾静脉大体积快速注射pCMV-mIL-12质粒后取血及主要器官,应用ELISA、PCR、RT-PCR及免疫组织化学染色等方法,检测质粒在组织器官中的分布与表达.为了研究重复注射质粒后mIL-12的表达,分别在首次注射后第7天、第14天和第30天二次注射相同剂量的质粒.每次注射前及注射后均取血检测mIL-12的表达及其诱导产生的IFN-γ及NO.结果:注射后10小时血清中的mIL-12蛋白水平最高,第7天恢复到基线值,其表达呈DNA剂量依赖性.IFN-γ及NO的表达高峰均出现在注射后第3天.首次注射后第14天及第30天重复注射可获得mIL-12的再次高效表达.结论:水流动力学注射方法是一种简便、有效的体内IL-12基因转移方式.重复应用水流动力学注射方法体内转移表达mIL-12的裸DNA后,可以获得转基因的再次高效表达,两次注射间隔时间至少为14天.
 
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  • (1) 水流动力学注射,质粒DNA,白细胞介素12,基因转移
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