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MUC1/Y胞外段在大肠杆菌中的表达和鉴定

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:8
摘 要:目的:获得MUC1/Y胞外段重组蛋白,研究其生物学功能,为肿瘤治疗提供实验依据。方法:利用RT―PCR从MCF7细胞中获得MUC1/Y胞外段编码基因,将其克隆到原核表达载体pET-32a中,并在BL2
  • 【题 名】MUC1/Y胞外段在大肠杆菌中的表达和鉴定
  • 【作 者】孙琳 吴秀丽 许艳 于永利 王丽颖
  • 【机 构】吉林大学基础医学院分子生物学教研室,长春130021
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2006年第22卷第9期,805-807页,811页
  • 【关键词】MUC1/Y胞外段 表达 鉴定
  • 【文 摘】目的:获得MUC1/Y胞外段重组蛋白,研究其生物学功能,为肿瘤治疗提供实验依据。方法:利用RT―PCR从MCF7细胞中获得MUC1/Y胞外段编码基因,将其克隆到原核表达载体pET-32a中,并在BL21(DE3)大肠杆菌中进行表达;以亲和层析法对MUC1/Y重组蛋白进行纯化;利用纯化的MUC1/Y蛋白免疫家兔制备MUC1/Y多克隆抗体,然后对乳腺癌组织进行组化染色。结果:在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了分子量为30000的Trx―MUC1/Y融合蛋白,经镍亲和层析一步纯化所获得的蛋白质纯度〉90%,用Trx-MUC1/Y融合蛋白免疫家兔获得的抗血清对乳腺癌组织的初步组化检测证明MUC1/Y融合蛋白具有很好的生物学活性。结论:成功表达并纯化了具有生物学活性的MUC1/Y胞外段重组蛋白。
 
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