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基因疫苗脾内免疫制备抗人c-kit单克隆抗体及其初步鉴定

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:5
摘 要:目的:用基因脾内免疫方法制备抗人c-kil单克隆抗体,并通过对抗体生物学特性的初步研究,确定该方法制备抗体的可行性。方法:利用分子克隆方法构建重组质粒pcDNA3.1/c-kit胞外区,脾内免疫BAL
  • 【题 名】基因疫苗脾内免疫制备抗人c-kit单克隆抗体及其初步鉴定
  • 【作 者】石琳 何大水 冯春玲 袁向飞 屈浩 黄丽华 张丽艳 王冬梅 张毅 张宇光
  • 【机 构】中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院,天津300020
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2008年第24卷第7期,644-648页,651页
  • 【关键词】c-kit 基因免疫 单克隆抗体
  • 【文 摘】目的:用基因脾内免疫方法制备抗人c-kil单克隆抗体,并通过对抗体生物学特性的初步研究,确定该方法制备抗体的可行性。方法:利用分子克隆方法构建重组质粒pcDNA3.1/c-kit胞外区,脾内免疫BALB/c小鼠一次,通过杂交瘤技术制备抗人c-kit单克隆抗体。采用流式细胞术、Western blot方法初步鉴定制备的抗体。结果:目的基因片段c-kit外区正确插入质粒pcDNA3.1,重组质粒免疫小鼠后通过杂交瘤技术获得了三株分泌抗人c-kit胞外区的杂交瘤细胞株6CA、2C5和5D5。其亚类均为IgM类,识别不同的抗原表位,其特异性与抗人c-kit抗体一致。结论:可用基因脾内一次免疫法制备抗人c-kit单克隆抗体。
 
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