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抗HPT单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:0
摘 要:目的:制备抗潮霉素B磷酸转移酶(HPT)的单克隆抗体(McAb),建立一种快速检测转基因作物中该选择标记基因HPT编码蛋白的方法。方法:用基因重组潮霉素B磷酸转移酶(HPT)抗原免疫BALB/C小鼠,
  • 【题 名】抗HPT单克隆抗体的制备与生物学特性鉴定
  • 【作 者】杨丽琛 张素香 皮国华 朱祯 杨晓光
  • 【机 构】[1]中国疾病预防控制中心营养与食品安全所,北京100050 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京100052 [3]中国科学院遗传与发育研究所,北京100101
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2004年第20卷第5期,335-337页
  • 【关键词】HPT 单克隆抗体 鉴定
  • 【文 摘】目的:制备抗潮霉素B磷酸转移酶(HPT)的单克隆抗体(McAb),建立一种快速检测转基因作物中该选择标记基因HPT编码蛋白的方法。方法:用基因重组潮霉素B磷酸转移酶(HPT)抗原免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb。选择不同的抗原决定簇与兔抗HPT多抗配对,建立双抗夹心ELISA检测HPT抗原。结果:筛选出四株稳定分泌抗HPT单抗的杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定均为IgG1,ELISA检测证实单抗可特异性识别细胞培养上清、重组子菌体裂解产物中及纯化出的HPT蛋白。结合位点测定实验表明4株单抗是针对不同的抗原决定簇,与多克隆抗体组成双抗夹心ELISA法,均可较好地检测到HPT抗原。检测的灵敏度为30ng/ml,且与别的无关抗原无交叉反应性。结论:4株杂交瘤细胞株特异性好,亲和力强,组成双抗夹心ELISA法可用于快速、灵敏检测HPT抗原。
 
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