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钙转运蛋白基因siRNA表达载体的构建及鉴定

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:10
摘 要:目的:构建针对钙转运蛋白(CaT1)特异性干扰RNA(siRNA)及其表达载体,并检测其对CaT1基因的干扰作用。方法:设计CaT1靶向的发夹状siRNA,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接人pSi
  • 【题 名】钙转运蛋白基因siRNA表达载体的构建及鉴定
  • 【作 者】杨新宇 张雷 郑花 康劲松 李洪岩 房学东
  • 【机 构】[1]吉林大学第二临床医院,长春130041 [2]吉林大学白求恩医学院病理生理教研室,长春130021
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2008年第24卷第3期,257-259页,262页
  • 【关键词】siRNA RNA干扰 钙转运蛋白 人胃癌细胞株BGC-823
  • 【文 摘】目的:构建针对钙转运蛋白(CaT1)特异性干扰RNA(siRNA)及其表达载体,并检测其对CaT1基因的干扰作用。方法:设计CaT1靶向的发夹状siRNA,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接人pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体转染法转染人类胃癌细胞BGC,通过RT-PCR检测CaT1基因表达水平的变化。结果:酶切鉴定与DNA测序分析证明CaT1基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CaT1基因的表达水平明显降低。结论:成功地构建了针对CaT1基因的siRNA载体,转染细胞后可抑制CaT1基因表达。
 
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  • (1) siRNA,RNA干扰,钙转运蛋白,人胃癌细胞株BGC-823
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