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人胱抑素C单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:9
摘 要:目的:制备人胱抑素C(Cystatin C,Cys C)的单克隆抗体(MCAb),并建立检测人血清CysC的颗粒增强透射免疫浊度分析法(PETIA)。方法:构建人Cys C的原核表达载体pET32a(
  • 【题 名】人胱抑素C单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用
  • 【作 者】陈婷梅 俸家富 涂植光
  • 【机 构】重庆医科大学检验系 临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室 重庆市临床检验诊断学重点实验室,重庆400016
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2008年第24卷第9期,828-830页
  • 【关键词】胱抑素C 单克隆抗体 颗粒增强透射免疫分析法
  • 【文 摘】目的:制备人胱抑素C(Cystatin C,Cys C)的单克隆抗体(MCAb),并建立检测人血清CysC的颗粒增强透射免疫浊度分析法(PETIA)。方法:构建人Cys C的原核表达载体pET32a(+)/Cys C,纯化Cys C重组蛋白并免疫BALB/C小鼠,杂交瘤技术制备Cys C的MCAb;以自制的MCAb包被乳胶颗粒,建立PETIA法测定血清Cvs C,并对其分析性能进行初步方法学评价。结果:建立分泌抗Cys C单克隆抗体的杂交瘤细胞株3株,其分泌的MCAb为IgG1,Western blot检测证实该抗体能与目的蛋白发生特异性结合;将杂交瘤细胞注射于小鼠腹腔,腹水中Cys C MCAb效价为1:4×10^6;用自制的McAb建立定量测定Cys C的PETIA,方法学评价试验结果证实我们建立的PETIA法,与进口试剂有很好的可比性,具有较满意的方法学性能。结论:成功制备了抗Cvs C单克隆抗体,该抗体可用于建立定量检测Cys C的PETIA法。
 
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