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TGF-β1 shRNA真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:1
摘 要:目的:观察构建成功的三个针对人转化生长因子β1(TGF-β1)的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达。方法:将真核表达载体psiSTRIKE-RNAi1、psiS
  • 【题 名】TGF-β1 shRNA真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达
  • 【作 者】马莎 吕昭萍 王应莉
  • 【机 构】[1]云南省第一人民医院风湿免疫科,昆明650032 [2]昆明医学院第一附属医院,昆明650032
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2009年第25卷第9期,780-782页
  • 【关键词】转化生长因子β1 RNA干扰 肺成纤维细胞 肺纤维化 基因治疗
  • 【文 摘】目的:观察构建成功的三个针对人转化生长因子β1(TGF-β1)的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达。方法:将真核表达载体psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3和对应的阴性对照载体经酶切鉴定和测序分析后,以Lipofectamine2000介导转染人肺成纤维细胞,48小时后应用实时荧光定量PCR检测人肺成纤维细胞TGF-β1mRNA的表达并用ELISA检测细胞上清液中TGF-β1蛋白质的浓度。结果:重组质粒经酶切和DNA测序证实插入片段的碱基序列与预期设计一致。转染组细胞TGF-β1表达受到明显抑制,以psiSTRIKE-RNAi2的抑制效应最为显著(P〈0.01)。结论:三个针对TGF-β1shRNA的重组质粒均能抑制TGF-β1在人肺成纤维细胞中的表达。
 
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  • (1) 转化生长因子β1,RNA干扰,肺成纤维细胞,肺纤维化,基因治疗
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