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免疫亲和层析法纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-21  浏览次数:2
摘 要:目的:制备可以纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体的免疫亲和层析柱。方法:纯化的抗抗CD3ScFv单克隆抗体与预活化的Sepharose4B偶联制成免疫亲和层析柱,采用自制的免疫亲和层析柱纯化由摇瓶发酵获
  • 【题 名】免疫亲和层析法纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体
  • 【作 者】王金宏 刘娟妮 高瀛岱 邵晓枫 熊冬生 杨纯正
  • 【机 构】中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所 实验血液学国家重点实验室,天津300020
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2008年第24卷第4期,356-359页
  • 【关键词】抗抗CD3ScFv单克隆抗体 抗Pgp/抗CD3双功能抗体 亲和层析
  • 【文 摘】目的:制备可以纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体的免疫亲和层析柱。方法:纯化的抗抗CD3ScFv单克隆抗体与预活化的Sepharose4B偶联制成免疫亲和层析柱,采用自制的免疫亲和层析柱纯化由摇瓶发酵获得的抗Pgp/抗CD3双功能抗体,采用间接免疫荧光法测定抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体能与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合活性。结果:成功地制备了可以纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体的免疫亲和层析柱,采用此柱纯化的抗体与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合的活性与带有E-tag纯化标志的抗体基本一致。结论:此介质可以替代价格高昂的E-tag亲和层析介质在纯化Pgp/抗CD3双特异双功能抗体中的应用,同时还可以避免由于E-tag纯化标志而带来的免疫原性问题,此项研究工作为抗Pgp/抗CD3双功能抗体将来在临床应用奠定了基础。
 
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