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His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-05-06  浏览次数:4
摘 要:目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3
  • 【题 名】His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性
  • 【作 者】曾瑞红 王卫华 房桂珍 龚伟 梅兴国 魏林
  • 【机 构】[1]河北医科大学免疫教研室,石家庄050017 [2]河北医科大学生物医学工程中心,石家庄050017 [3]军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850
  • 【刊 名】《中国免疫学杂志》 2008年第24卷第12期,1066-1070页
  • 【关键词】呼吸道合胞病毒 His-tag 重组蛋白G1F/M2 免疫原性
  • 【文 摘】目的:观察His-tag是否影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。方法:PCR扩增G1和F/M2基因片段,插入表达载体pET-His和pET-DsbA-His中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni^+螯合亲和层析法纯化得His-G1F/M2和DsbA-His-G1F/M2,将后者用凝血酶消化,再经Ni+螯合亲和层析法纯化得G1F/M2,将His-G1F/M2和G1F/M2免疫BALB/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT法测定细胞毒性T细胞活性(CTL)。结果:两种蛋白在BALB/c小鼠中诱导的RSV特异性抗体和CTL活性无显著差异。结论:His-tag不影响RSV重组蛋白G1F/M2的免疫原性。
 
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