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大肠杆菌L-色氨酸合成的代谢流分析

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:14
摘 要:目的:从代谢流的层面研究育种过程中基因操作对色氨酸积累的影响,为色氨酸菌种选育的设计思路提供理论指导和验证。方法:根据实验菌株的代谢特点构建£一色氨酸代谢网络图,对出发菌株TRTH0709,及其重组菌株TRTH1013、TRTH1105和T
  • 【题 名】大肠杆菌L-色氨酸合成的代谢流分析
  • 【作 者】申彤 徐庆阳 张成林 谢希贤
  • 【机 构】天津科技大学生物工程学院 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津300457 新疆大学生命科学与技术学院 新疆乌鲁木齐830046
  • 【刊 名】《生物技术通讯》2014年 第1期 49-52页 共4页
  • 【关键词】L-色氨酸' 代谢流' 大肠杆菌' 转酮酶' 磷酸烯醇式丙酮酸合成酶' 贮碳因子
  • 【文 摘】目的:从代谢流的层面研究育种过程中基因操作对色氨酸积累的影响,为色氨酸菌种选育的设计思路提供理论指导和验证。方法:根据实验菌株的代谢特点构建£一色氨酸代谢网络图,对出发菌株TRTH0709,及其重组菌株TRTH1013、TRTH1105和TRTH1107在30L发酵罐中进行分批流加发酵试验,在发酵进入稳定期后的26.28h,分别检测主要胞外代谢物的浓度并计算变化速率。结果和结论:得到了各菌株在拟稳态下的代谢流分布图。转酮酶基因(tktA)和磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因(ppsA)过表达能显著影响中心代谢途径,使代谢流向有利于色氨酸合成的方向改变,贮碳因子基因(csrA)敲除的影响较小,但在tktA和ppsA过表达质粒存在的情况下对色氨酸合成的代谢流有明显的促进作用。进一步的菌种改造仍有待进行,葡萄糖转运系统的替代和三羧酸循环的减弱是主要方向。
 
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