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幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-22  浏览次数:4
摘 要:目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性。方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中,0.5mmoL
  • 【题 名】幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性
  • 【作 者】周珍文 关锐梨 夏慧敏 邓秋连 谢永强 黄勇 廖灿 龚四堂
  • 【机 构】广州市妇女儿童医疗中心
  • 【刊 名】《实用医学杂志》2010年 第20期 3673-3675页 共3页
  • 【关键词】螺杆菌,幽门 尿素酶B 免疫活性
  • 【文 摘】目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性。方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中,0.5mmoL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,使用纯化的重组蛋白免疫小鼠,ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blotting鉴定重组蛋白反应原性。结果:SDS-PAGE示在约87kD相应分子量可见融合蛋白表达,产物主要在表达上清以可溶形式存在,纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性IgG效价为1:51200,Westernblotting示重组蛋白能被幽门螺杆菌感染患者血清识别。结论:UreB在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有较好的免疫原性及反应原性。
 
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