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昆明小鼠胚胎干细胞向心肌细胞的分化

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:15
摘 要:目的饲养层制作及复苏培养昆明小鼠胚胎干细胞,探索体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化。方法饲养层制作,复苏及体外培养胚胎干细胞,采用一步法消化贴壁胚胎干细胞,悬浮培养5d,形成拟胚体(EB),待EB贴壁后
  • 【题 名】昆明小鼠胚胎干细胞向心肌细胞的分化
  • 【作 者】孙晓冬 董韬 刘春玲 董建将 李静 张羽飞 武艳
  • 【机 构】哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室 黑龙江哈尔滨150081 牡丹江医学院组织学与胚胎学教研室 黑龙江牡丹江157011 齐齐哈尔医学院病理解剖学教研室 黑龙江齐齐哈尔161006
  • 【刊 名】《解剖科学进展》2010年 第6期 519-522页 共4页
  • 【关键词】胚胎干细胞 悬浮培养 拟胚体 淫羊藿苷 心肌合胞体 昆明小鼠
  • 【文 摘】目的饲养层制作及复苏培养昆明小鼠胚胎干细胞,探索体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化。方法饲养层制作,复苏及体外培养胚胎干细胞,采用一步法消化贴壁胚胎干细胞,悬浮培养5d,形成拟胚体(EB),待EB贴壁后,加入淫羊藿苷(Icraiin,ICA)诱导液对其诱导并每天观察,免疫荧光检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(cTnT)和心室肌球蛋白轻链(MLC-2v)的表达。结果胚胎干细胞悬浮聚集5d,形成类似球状的拟胚体,将拟胚体贴壁诱导8d,发现拟胚体中出现跳动,诱导后10d拟胚体跳动率达65%,显著高于空白对照组和阴性对照组,一个分化拟胚体中一般出现1-3个跳动点,节律约为50-80times/min,在诱导10d时跳动的合胞体,免疫荧光表明cTnT和MLC-2v表达为阳性。结论胚胎干细胞经悬浮聚集培养5d后经10-7mol/L淫羊藿苷诱导,得到了可以跳动的心肌细胞团。
 
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