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脂质体转染质粒DNA成功导入小鼠受精卵

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:19
摘 要:目的研究脂质体转染方法将质粒DNA导入小鼠受精卵中的可行性。方法用免疫细胞化学方法在受精卵内检测pAkt(Ser473)蛋白的分布。用脂质体转染的方法将质粒FLAG-PIPP或FLAGvector导入
  • 【题 名】脂质体转染质粒DNA成功导入小鼠受精卵
  • 【作 者】邓欣 赵宇 李亘松 朱亚勤 刘莹 宋阳 崔城 于秉治
  • 【机 构】中国医科大学基础医学院机能实验中心 辽宁沈阳110001 中国医科大学附属盛京医院急诊科 辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生理教研室 辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室 辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 辽宁沈阳110001
  • 【刊 名】《解剖科学进展》2010年 第6期 514-518页 共6页
  • 【关键词】转染 小鼠 受精卵 透明带 pAkt(Ser473)
  • 【文 摘】目的研究脂质体转染方法将质粒DNA导入小鼠受精卵中的可行性。方法用免疫细胞化学方法在受精卵内检测pAkt(Ser473)蛋白的分布。用脂质体转染的方法将质粒FLAG-PIPP或FLAGvector导入受精卵,再用Western Blot检测两组卵细胞中pAkt(Ser473)的表达量。用荧光显微镜检测GFP-PH/ARNO质粒在卵细胞中的表达同时观察胰岛素对其影响。结果 pAkt(Ser473)抗体成功穿过透明带表达在受精卵内,细胞膜表达最强。与FLAGvector转染的受精卵相比,pAkt(Ser473)在转染FLAG-PIPP质粒的受精卵内表达量明显减少。与PIP3结合的GFP-PH/ARNO绿色荧光以细胞核表达为主,并且胰岛素可以使荧光增强。结论脂质体转染方法可成功地将质粒DNA穿过透明带导入小鼠受精卵内。
 
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  • (1) 转染,小鼠,受精卵,透明带,pAkt(Ser473)
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