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具荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中的重组表达

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:2
摘 要:为探索节旋藻藻蓝蛋白的生物合成机理,以钝顶节旋藻(ArthrospiraplatensisFACHB314)基因组DNA为模板克隆了藻蓝蛋白a亚基基因cpcA、催化脱辅基蛋白与色基结合的裂合酶基因cp
  • 【题 名】具荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中的重组表达
  • 【作 者】衣俊杰 臧晓南 张学成 袁定阳 赵炳然 唐俐
  • 【机 构】中国海洋大学海洋生命学院 山东青岛266003 国家杂交水稻工程技术研究中心 湖南长沙410125
  • 【刊 名】《中国海洋大学学报:自然科学版》2011年 第5期 59-62页 共5页
  • 【关键词】节旋藻 藻蓝蛋白α亚基基因 裂合酶基因 重组 大肠杆菌
  • 【文 摘】为探索节旋藻藻蓝蛋白的生物合成机理,以钝顶节旋藻(ArthrospiraplatensisFACHB314)基因组DNA为模板克隆了藻蓝蛋白a亚基基因cpcA、催化脱辅基蛋白与色基结合的裂合酶基因cpcE和cpcF,以及催化色基合成的铁氧蛋白氧化还原酶基因pcyA;以Synechocystissp.PCC6803基因组DNA为模板克隆了亚铁血红素氧化酶基因hoxl。然后分别将cpcA、cpcE和cpcF基因构建到质粒pACYCDuet-1中,将hoxl和pcyA基因构建到质粒pET-24a(+)中,用电击法将二者共同转化EcoliBL21(DE3),经诱导表达得到具有荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基。在590nm激发波长下,荧光发射峰为637.8nm,证实了节旋藻自身的裂合酶CpcE和CpcF能够催化色基PCB与藻蓝蛋白脱辅基结合产生有荧光活性的藻蓝蛋白α亚基,为表达有荧光活性的藻蓝蛋白提供理论和实验基础。
 
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