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水稻硝酸还原酶基因5’上游序列的克隆与序列分析

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:2
摘 要:以日本晴水稻幼苗叶的基因组总DNA为模板,采用PCR方法扩增获得约1300bp大小的DNA片段,回收该片段并与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌感受态,并提取质粒DNA.用凝胶电泳检测和酶切鉴定,选
  • 【题 名】水稻硝酸还原酶基因5’上游序列的克隆与序列分析
  • 【作 者】胡静 吴文华
  • 【机 构】湖北大学生命科学学院 武汉430062
  • 【刊 名】《华中师范大学学报:自然科学版》2009年 第2期 284-288页 共5页
  • 【关键词】日本晴水稻 硝酸还原酶基因 5’上游序列 基因克隆
  • 【文 摘】以日本晴水稻幼苗叶的基因组总DNA为模板,采用PCR方法扩增获得约1300bp大小的DNA片段,回收该片段并与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌感受态,并提取质粒DNA.用凝胶电泳检测和酶切鉴定,选取阳性克隆进行测序分析.测序结果显示,该片段含1376个核苷酸对;应用NCBI网站的BLAST软件对本试验中克隆的序列与GenBank(NC_008401)公布的水稻硝酸还原酶基因启动子序列进行比对,有3个核苷酸差异,同源性为99%,证实本试验中克隆的DNA序列为水稻硝酸诱导基因启动子.该序列含有多个与转录调控有关的保守序列(如TATA―box、CAAT―box和GAGA―box).此序列的成功克隆,为今后开展水稻等重要农作物转基因研究奠定基础.
 
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  • (1) 日本晴水稻,硝酸还原酶基因,5’上游序列,基因克隆
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