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巴西橡胶树顺式异戊烯基转移酶基因cDNA克隆及其序列特征分析

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:0
摘 要:以巴西橡胶树(Hevea bras iliens is )胶乳的RNA为Tester;叶片RNA为Driver,利用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridizat
  • 【题 名】巴西橡胶树顺式异戊烯基转移酶基因cDNA克隆及其序列特征分析
  • 【作 者】罗明武 邓柳红 易小平 曾会才 肖苏生
  • 【机 构】海南大学材料与化工学院 海南儋州571737 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 农业部热带作物生物技术重点开放实验室 海口571101
  • 【刊 名】《热带亚热带植物学报》2009年 第3期 223-228页 共6页
  • 【关键词】巴西橡胶树 抑制消减杂交法 胶乳 cis-异戊烯基转移酶
  • 【文 摘】以巴西橡胶树(Hevea bras iliens is )胶乳的RNA为Tester;叶片RNA为Driver,利用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库。通过反式Northern点杂交(reverse Northern dot blots)筛选到一个与顺式异戊烯基转移酶基因(橡胶生物合成的关键酶基因)高度同源的阳性克隆R363。采用RACE方法获得该克隆的全长cDNA(GenBank登陆号:AY461414)。序列分析表明,该基因长1156bp,含有873bp的阅读框,编码290个氨基酸,分子量约为32.9kD,等电点为7.2,含有N-端跨膜螺旋区。同源性分析表明R363编码的蛋白质具有异戊烯基转移酶家族的特征,含有c西-异戊烯基链转移酶的5个高度保守区,推测R363可能是一种新的顺式.异戊烯基转移酶基因。Northern blot分析显示,R363在胶乳中高度表达,在叶中不表达。乙烯处理前后表达强度一致,表明该基因表达不为乙烯所诱导。
 
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