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应用酵母双杂交系统筛选橡胶延长因子REF的互作蛋白

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:3
摘 要:利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Heveabrc brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(0RF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD―GAL4-REF,并筛选以pAD―GAL4―2
  • 【题 名】应用酵母双杂交系统筛选橡胶延长因子REF的互作蛋白
  • 【作 者】曾日中 李先昆 聂智毅 代龙军 黎瑜 段翠芳
  • 【机 构】中国热带农业科学院橡胶研究所 农业部橡胶树生物学重点开放实验室 省部共建国家重点实验室培育基地 海南儋州571737
  • 【刊 名】《热带亚热带植物学报》2011年 第5期 400-406页 共7页
  • 【关键词】橡胶树 橡胶延长因子REF 橡胶生物合成 酵母双杂交系统
  • 【文 摘】利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Heveabrc brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(0RF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD―GAL4-REF,并筛选以pAD―GAL4―2.1载体构建的橡胶树胶乳cDNA文库,对阳性克隆的cDNA插入片段进行测序及生物学功能分析。通过酵母双杂交筛选,共获得5种可能与REF互作的候选蛋白质,它们分别为与诱饵蛋白REF高度同源的REF家族成员、小橡胶粒子蛋白(SRPP)、翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)、激发子响应蛋白和泛素耦联酶E2,这表明橡胶延长因子REF除了与自身高度同源蛋白质可能存在相互作用之外,还可能与TCTP和激发子响应蛋白等其它蛋白质发生相互作用。这些结果有助于揭示橡胶粒子的生物学功能。
 
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