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大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体的构建

放大字体  缩小字体 更新日期:2018-11-26  浏览次数:9
摘 要:目的构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在神经元中的表达。方法采用PCR方法获得GluR2基因启动子区目的片段(-298~+283),双酶切后插入到pGL3-Basic载
  • 【题 名】大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体的构建
  • 【作 者】贾玉红 马天舒 姜妙娜 孙杰 李淑艳 贾弘A
  • 【机 构】大连医科大学病理生理学教研室 辽宁省大连市116044 大连市中医研究所 辽宁省大连市116013 北京大学医学部生物化学与分子生物学系 北京市100191
  • 【刊 名】《医学分子生物学杂志》2009年 第5期 387-390页 共4页
  • 【关键词】GluR2 神经元 pGL3-Basic 基因表达构建 萤火虫荧光素酶
  • 【文 摘】目的构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在神经元中的表达。方法采用PCR方法获得GluR2基因启动子区目的片段(-298~+283),双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光素酶报告基因的表达受GluR2启动子控制。将构建的重组表达载体或pGL3-Basic载体分别与内参质粒pRL―CMV(表达海肾荧光素酶)共转染原代培养皮质神经元,24h后用双荧光检测试剂盒测定萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶活性。结果重组表达载体经双酶切及测序鉴定证明构建正确,该重组表达载体在神经元中特异性高表达萤火虫荧光素酶。结论成功构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测到该载体在神经元中的特异性表达。
 
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  • (1) GluR2,神经元,pGL3-Basic,基因表达构建,萤火虫荧光素酶
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