关注:1077 2010-04-13 15:39

【求助】有关激酶实验的方法和问题

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2016-02-10 22:49

现有一合成药物,通过kinases assays kits 发现,药物可以与几个不同的激酶有结合,我们预测药物可能是激酶的抑制剂,想请教一下如果化合物是激酶的抑制剂,通过基因工程验证的时候是应该采取基因敲除的方法knock down 激酶相关基因,检测药物作用效果减弱,还是应该过表达相关基因,药物作用发现IC50有变化,哪一种方法比较靠谱呢?

  支持(0)  |   反对(0)   |  我来评论 2010-04-26 15:27

我觉得应该看你研究的重点是kinase的功能还是化合物的效果,看你的意思是确认化合物的抑制效果。
先做体外Ser/Thr kinase assay,除了得出有结合外,应该还可以能够初步得到你的化合物是agonist还是antagonist的结果啊。那么对于agonist,则应该down-regulate相关基因;而antagonist则应该过表达相关基因,来考察化合物的效果,而此时knock-down相关激酶基因,不能给出太多信息,最多做个对照而已!