关注:1410 2010-04-02 14:29

湿法上样后,样品在柱头停留多久开始接流动相?

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2016-02-10 22:49

葡聚糖凝胶LH-20 湿法上样后,样品是直接接洗脱液啊还是应该吸附一段时间之后在开始接?如果需要停留一段时间,那应该是多久呢?还有,如果停留的话,是不是容易造成死吸附?上次我等了半小时开始接的,最后有一点没洗干净,但是马上开始走柱子的话会不会影响柱效呢??

  支持(0)  |   反对(0)   |  我来评论 2010-04-15 15:04
1. 凝胶柱:一般在流动相刚好流光时,关上柱子,把样品溶液小心加到凝胶柱上去就可以了,然后用少量流动相润洗一下样品瓶,顺便润洗一下柱子内壁上沾的样品。然后打开柱子,让这一点样品溶液和润洗液慢慢流下去,等柱子上看不到溶液了,就可以加入干净的流动相,直接洗脱就可以了。
2. 凝胶注意不能流速太快,太快了分离效果不好。
3. 凝胶柱的死吸附很小的,不过对于一些酚性的东西和大极性的色素,还是会有死吸附的。我觉得跟停留时间没有关系。