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实时定量逆转录PCR检测慢性淋巴细胞白血病中脂蛋白酯酶mRNA的表达及临床意义

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-07  浏览次数:3
摘 要:目的研究慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者脂蛋白酯酶(LPL)表达情况,探讨LPL在CLL预后中的意义。方法采用基于Taqman探针技术的实时定量逆转录PCR(qRT―PCR)方法检测62例CLL患者及
  • 【题 名】实时定量逆转录PCR检测慢性淋巴细胞白血病中脂蛋白酯酶mRNA的表达及临床意义
  • 【作 者】沈秋丹 徐卫 顾卫军 乔纯 缪扣荣 朱丹霞 吴雨洁 刘琼 李建勇
  • 【机 构】南京医科大学第一附属医院血液科,210029
  • 【刊 名】《中华检验医学杂志》 2009年第32卷第5期,552-556页
  • 【关键词】白血病,淋巴细胞,慢性,B细胞 脂蛋白脂酶 逆转录聚合酶链反应 预后
  • 【文 摘】目的研究慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者脂蛋白酯酶(LPL)表达情况,探讨LPL在CLL预后中的意义。方法采用基于Taqman探针技术的实时定量逆转录PCR(qRT―PCR)方法检测62例CLL患者及10名健康对照者外周血标本中LPL的表达水平。对LPL表达水平与免疫球蛋白重链可变区(IgVH)基因突变、ZAP-70蛋白和CD38表达等预后因素进行相关性分析。采用ROC曲线确定LPL表达的最佳分界值,计算其对IgVH突变情况的阳性及阴性预测值。结果qRT―PCR标准曲线的R^2均≥0.990,敏感度可以检测到10^2拷贝/μg RNA,批内差及批间差变异系数(CV)均小于5%。62例CLL患者LPL表达水平中位数为0.0060(0~0.7370)。在10名健康对照者中LPL均不表达或低表达,LPL中位表达水平为0(0―0.0004)。在经CD19磁珠分选后的3份CLL患者标本中,LPL相对表达量分别为0,0360、0.0750和0.1970,与分选前表达水平(分别为0.0240、0.0740和0.2250)相似。LPL表达水平与IgVH基因突变情况相关(r=0.45,P〈0.05),无突变患者的LPL中位表达水平为0.0060(0.0007―0.1100),明显高于突变患者的LPL中位表达水平[0.0020(0.0002~0.0270)],差异有统计学意义(U=96.5,P〈0.05);LPL表达水平与ZAP-70(r=0.38,P〈0.05)及CD38(r=0.43,P〈0.05)均显著相关。按照IgVH突变情况作为标准对LPL表达水平做ROC曲线分析,确定最佳分界值为0.0360,敏感度为66.7%,特异度为72.4%,对IgVH突变情况阳性预测值(无突变)为51.8%,阴性预测值(有突变)为83.3%。结论qRT-PCR方法检测LPL表达敏感可靠。LPL表达水平与CLL重要预后因素IgVH基因突变、ZAP-70、CD38密切相关,并可较准确地预测IgVH突变情况,在CLL的预后中具有重要价值。
 
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