当前位置: 首页 » 资料 » 健康论文 » 腺病毒介导的人肝细胞生长因子对大鼠脑膜间皮细胞的转染效率及增殖和迁移效应

腺病毒介导的人肝细胞生长因子对大鼠脑膜间皮细胞的转染效率及增殖和迁移效应

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的观察腺病毒介导的人肝细胞生长因子(Ad―HGF)对大鼠脑膜间皮细胞(RMMC)的转染效率及增殖和迁移效应。方法原代培养RMMC并鉴定;携带增强型GFP基因的腺病毒载体(Ad5-EGFP)转染RMM
  • 【题 名】腺病毒介导的人肝细胞生长因子对大鼠脑膜间皮细胞的转染效率及增殖和迁移效应
  • 【作 者】魏丹 李彤 李莉 张平 李合华 宋志秀 闫海清 常利
  • 【机 构】新乡医学院第一附属医院神经内三科 河南省卫辉市453100 河南安阳地区医院神经内二科 河南省直第一医院眼科
  • 【刊 名】《中华脑科疾病与康复杂志(电子版)》2012年 第6期 28-33页 共6页
  • 【关键词】脑膜间皮细胞 转染 细胞增殖 细胞迁移 肝细胞生长因子 腺病毒,介 导,人
  • 【文 摘】目的观察腺病毒介导的人肝细胞生长因子(Ad―HGF)对大鼠脑膜间皮细胞(RMMC)的转染效率及增殖和迁移效应。方法原代培养RMMC并鉴定;携带增强型GFP基因的腺病毒载体(Ad5-EGFP)转染RMMC,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测其转染细胞的最佳转染强度(MOI);酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测不同转染强度(25、50、100及200PFU/细胞)Ad―HGF转染RMMC后上清液中肝细胞生长因子(HGF)的表达;ELISA法检测不同时间点(0、2、4、6.8、10、12及14d)上清液中HGF的表达;MTT法检测不同体积百分数(0%、25%、50%、75%、100%)表达上清对细胞的增殖效应;Transwells法和划痕实验检测表达上清对细胞的迁移效应。应用曲线拟合完成直线回归方程,两样本均数比较采用独立样本t检验,多组间比较选用单因素方差分析。结果体外成功培养并鉴定RMMC;Ad5-EGFP转染细胞MOI为200PFU/细胞,转染效率高达96.21%;上清液中HGF的表达随MOI增加而增加,且呈一定浓度依赖性,差异有显著性(F=407.851,P〈0.05),MOI=200PFU/细胞时,HGF表达量为(97.275±3.035)ng/ml;HGF表达量呈一定时间依赖性,差异有统计学意义(F=384.063,P〈0.05),转染后48h达高峰,峰值为(104.275±2.356)ng/ml,随后下降,10d下降明显,随后保持相对稳定水平;表达上清对RMMC有明显促增殖效应,且呈一定浓度依赖性,差异有统计学意义(F=285.946,P〈0.05);表达上清对RMMC有促迁移效应,差异有统计学意义(t=34.135,P〈0.05)。结论Ad―HGF可高效转染大鼠脑膜间皮细胞并在细胞中表达,表达上清对细胞有明显促增殖和促迁移效应。
 
本文导航:
  • (1) 脑膜间皮细胞,转染,细胞增殖,细胞迁移,肝细胞生长因子,腺病毒,介,导,人
  • 下一篇:鳖甲
  • 上一篇:暂无
 
[ 资料搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]

 

 
推荐图文
推荐资料
热门关注