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Ⅱ型单纯疱疹病毒培养及gG-2基因特异片段的克隆

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的:通过培养和扩增Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)并提取其全基因组,从而克隆包膜糖蛋白gG-2全长基因及其保守性较高、抗原性较强的特异片段。方法:将HSV-2病毒感染Hela细胞获得大量病毒液,用酚-
  • 【题 名】Ⅱ型单纯疱疹病毒培养及gG-2基因特异片段的克隆
  • 【作 者】高建 黄宇烽 曹晶 王浩洋 陆金春
  • 【机 构】南京师范大学生命科学学院 江苏南京210046 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所 江苏南京210002 南京医科大学基础医学院微生物与免疫学系 江苏南京210029 武警江苏总队医院南京分院检验科 江苏南京210028
  • 【刊 名】《中华男科学杂志》2009年 第3期 223-227页 共5页
  • 【关键词】Ⅱ型单纯疱疹病毒 gG-2 病毒感染
  • 【文 摘】目的:通过培养和扩增Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)并提取其全基因组,从而克隆包膜糖蛋白gG-2全长基因及其保守性较高、抗原性较强的特异片段。方法:将HSV-2病毒感染Hela细胞获得大量病毒液,用酚-氯仿法提取病毒全长基因组,并以此为模板扩增编码gG-2的US4基因,再根据氨基酸序列比对结果,选取其特异片段,设计带酶切位点的引物克隆gG-2基因特异片段。结果:成功地获得了大量HSV-2病毒液并提取了病毒基因组,克隆了gG-2全长基因以及特异片段,测序证实,两者均与GenBank中报道的序列相一致。结论:对于遗传特性相对稳定的HSV-2来说,通过病毒感染细胞的方法短时期内获得大量病毒液,并从病毒全基因组中克隆gG-2特异基因片段的方法是可行的,从而为进一步构建gG-2特异片段相关载体、表达相应蛋白奠定了基础。
 
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