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氯化锶激活对小鼠体细胞核移植胚胎卵裂率和囊胚率的影响

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:1
摘 要:目的:建立氯化锶(SrCl2)诱导小鼠体细胞核移植胚胎激活的最佳方法。方法:首先构建及鉴定小鼠核移植胚胎,在注核完成后,使用以下实验激活核移植胚胎:实验1,采用5 mmol/L和10 mmol/L S
  • 【题 名】氯化锶激活对小鼠体细胞核移植胚胎卵裂率和囊胚率的影响
  • 【作 者】覃敏 莫曾南 何敏 李慕军 杨小丽 黄林
  • 【机 构】广西医科大学第一附属医院人类精子库 广西医科大学泌尿科学研究所 广西南宁530021
  • 【刊 名】《中华男科学杂志》2012年 第10期 909-914页 共6页
  • 【关键词】核移植 激活 氯化锶 小鼠 体外
  • 【文 摘】目的:建立氯化锶(SrCl2)诱导小鼠体细胞核移植胚胎激活的最佳方法。方法:首先构建及鉴定小鼠核移植胚胎,在注核完成后,使用以下实验激活核移植胚胎:实验1,采用5 mmol/L和10 mmol/L SrCl2处理核移植胚胎1~8 h,观察时间对卵裂率和囊胚率的影响;实验2,在4、6 h采用1~20 mmol/L多种浓度SrCl2处理核移植胚胎,观察不同浓度对卵裂率和囊胚率的影响;实验3,研究10 mmol/L SrCl2配合不同培养液激活核移植胚胎的效果;实验4,观察10 mmol/L SrCl2联合蛋白激酶抑制剂6-DMAP、细胞松驰素(CB)对体外培育核移植胚胎的影响。结果:研究发现当浓度一致时(5 mmol/L),6 h组卵裂率(38.9%)与1 h组(6.7%)、2 h组(22.8%)、3 h组(22.8%)、4 h组(25.6%)比较差异均有显著性(P〈0.05),但与5 h组(28.9%)、7 h组(34.4%)、8 h组(28.9%)均无显著差异(P〉0.05);当时间固定时(6 h),SrCl2浓度为10 mmol/L获得的卵裂率和囊胚率(68.9%和7.2%)较高,较1 mmol/L组(28.3%和0%)、2.5 mmol/L组(35.6%和0%)、5 mmol/L组(37.8%和1.1%)、7.5 mmol/L组(60.6%和2.2%)、15 mmol/L组(51.7%和1.1%)和20 mmol/L组(41.7%和1.1%)均高(P〈0.05);不同成分培养液实验显示,含Ca2+和Mg2+KSOM组的胚胎卵裂率较低,仅为27.8%,与不含Ca2+组(69.4%)、不含Ca2+/Mg2+组(66.1%)和添加EDTA组(68.3%)比较差异均显著(P〈0.05);虽然SrCl2联合各培养液对核移植胚胎体外发育影响不大,但SrCl2联合CB组囊胚细胞计数(45.40±2.23)较未联合组(30.15±1.12)、联合6-DMAP组(34.95±1.38)、联合6-DMAP+CB组(37.45±1.43)均显著增多(P〈0.05)。结论:10 mmol/L SrCl2单独处理6 h或联合CB均能较好地激活小鼠体细胞核移植胚胎。
 
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