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沉默PKM2增强藤黄酸诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的敏感性

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的:研究沉默丙酮酸激酶M2型(PKM2)对藤黄酸(GA)诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法:设计并合成针对PKM2的3条特异性siRNA及阴性对照siRNA(si―NC
  • 【题 名】沉默PKM2增强藤黄酸诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的敏感性
  • 【作 者】吕磊 汪良 蒋国松 章传华 曾甫清
  • 【机 构】武汉市第一医院泌尿外科 湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科 湖北武汉430022
  • 【刊 名】《中华男科学杂志》2013年 第2期 102-106页 共5页
  • 【关键词】藤黄酸 丙酮酸激酶M2型 前列腺癌 敏感性 凋亡
  • 【文 摘】目的:研究沉默丙酮酸激酶M2型(PKM2)对藤黄酸(GA)诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法:设计并合成针对PKM2的3条特异性siRNA及阴性对照siRNA(si―NC)。利用脂质体将PKM2siRNA和si-NC转染至人前列腺癌PC3细胞并检测PKM2siRNA的沉默效率。MTY和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双重染色法分别检测沉默PKM2后GA对PC3细胞生长活性和凋亡的影响。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测c―myc和cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平。结果:与si―NC组比较,3条PKM2siRNA都能够有效下调PKM2的mRNA和蛋白表达水平,其中PKM2siRNA-1的沉默效率最高。转染PKM2siRNA-124h后,PC3细胞中PKM2mRNA和蛋白表达水平分别下调70%和85%(P〈0.05)。转染PKM2siRNA.1后给予0.5μmol/L的GA处理24h,PC3细胞生长活性明显受到抑制(对照组的68%)且凋亡诱导增加,而且c.myc和cyclinD1基因的mRNA和蛋白的表达水平显著下调(c-myc分别为对照组的50%和35%;cyclinD1分别为对照组的60%和20%,P〈0.05)。结论:抑制PKM2能够提高GA诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的敏感性,PKM2可能成为GA治疗前列腺癌的有效增敏靶点。
 
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