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蛋白激酶Cβ2-活性氧交互环介导高糖致内皮细胞损伤记忆效应

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为体外模拟高血糖记忆的研究对象,观察蛋白激酶C(PKC)β2、活性氧(ROS)对其表达血管内皮生长因子(VEGF)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)mRNA的
  • 【题 名】蛋白激酶Cβ2-活性氧交互环介导高糖致内皮细胞损伤记忆效应
  • 【作 者】林雪波 周波 孙芳 陈芳芳
  • 【机 构】重庆医科大学附属第一医院内分泌科
  • 【刊 名】《中华内科杂志》2010年 第3期 239-244页 共6页
  • 【关键词】蛋白激酶C 活性氧 内皮细胞 血糖 代谢记忆
  • 【文 摘】目的以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为体外模拟高血糖记忆的研究对象,观察蛋白激酶C(PKC)β2、活性氧(ROS)对其表达血管内皮生长因子(VEGF)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)mRNA的影响,并探讨PKCβ2、ROS在其中可能的交互作用。方法将培养的HUVECs分为以下5组:正常糖(NG,5mmol/LD-葡萄糖×3周)组、高糖(HG,25mmol/LD-葡萄糖×3周)组、记忆(M,25mmol/LD-葡萄糖×2周+5mmol/LD-葡萄糖×1周)组、记忆PKCp,转染[MB,25mmol/LD-葡萄糖×2周+5mmol/LD.葡萄糖×1周+PKCp2重组腺病毒(Ad5-PKC[32)]组、记忆+Ot-硫辛酸(MA,25mmol/LD-葡萄糖×2周+5mmol/LD-葡萄糖×1周+62.5μmol/LOt-硫辛酸)组。以RT―PCR法检测VEGF、VCAM.1mRNA表达水平,用荧光显微镜和荧光酶标仪测定ROS水平,采用激光共聚焦检测PKCβ2蛋白的表达和转位。结果(1)HG组和M组VEGF、VCAM-1mRNA表达增加,分别为NG组的1.76倍、1.35倍和1.69倍、1.43倍(P值均〈0.05)。(2)HG组和M组ROS水平分别较NG组升高了86%、80%(P值均〈0.05);MA组ROS水平较M组下降了38%,同时MA组VEGF、VCAM-1mRNA表达亦较M组显著下调,分别为M组的67%、78%(P值均〈0.05)。(3)HG组和M组PKCβ2核转位激活,定量分析显示,胞质/胞核荧光强度比值均较NG组下降,分别为NG组的70%、74%(P值均〈0.05);MB组PKCβ2核转位较M组更为明显,胞质/胞核荧光强度比值为M组的77%,同时MB组VEGF、VCAM-1mRNA表达亦较M组进G 步上调,分别为M组的1.29倍、1.18倍(P值均〈0.05)。(4)MA组PKCβ2核转位较M组减少,胞质/胞核荧光强度比值为M组的1.18倍;而MB组ROS水平较M组上调了25%(P值均〈0.05)。结论HUVECs存在高糖记忆效应,PKCβ2-ROS交互环可能介导了这个效应的发生。
 
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  • (1) 蛋白激酶C,活性氧,内皮细胞,血糖,代谢记忆
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