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PLK1基因siRNA的构建及对甲状腺未分化癌细胞增殖和凋亡的影响

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:3
摘 要:目的构建保罗样激酶-1(PLK1)基因小干扰RNA(siRNA),并观察其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法设计合成5个PLK1siRNA(S1、S2、S3、S4、S5),转染人甲状腺癌ARO细胞后
  • 【题 名】PLK1基因siRNA的构建及对甲状腺未分化癌细胞增殖和凋亡的影响
  • 【作 者】柳迎昭 俞力 龚丹丹 周永静 武正炎 蒋鹏程 范钰
  • 【机 构】江苏大学附属人民医院肿瘤研究所 江苏省镇江市分子内分泌实验室 江苏省人民医院普外科
  • 【刊 名】《中华内分泌外科杂志》2011年 第2期 76-79页 共4页
  • 【关键词】甲状腺肿瘤 PLK1 小干扰RNA 增殖 凋亡
  • 【文 摘】目的构建保罗样激酶-1(PLK1)基因小干扰RNA(siRNA),并观察其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法设计合成5个PLK1siRNA(S1、S2、S3、S4、S5),转染人甲状腺癌ARO细胞后,采用实时定量RT―PCR方法筛选下凋PLK1mRNA效果最好的siRNA;然后以该siRNA转染ARO细胞后,分别以实时定量RT―PCR和Western blot检测各组细胞PLK1基因表达情况;以MTT法检测对各组细胞增殖的影响;分别以caspase-3活性和TUNEL方法明确甲状腺癌细胞凋亡情况。结果5个siRNA均明显下调PLK1mRNA水平,以S4效果最好,抑制率达91.5%。MTT结果显示,S4siRNA转染对甲状腺癌细胞增殖均有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(P〈0.05)。与对照组比较,S4siRNA转染组癌细胞caspase-3活性明显升高,且呈浓度和时间依赖性(r=0.919;r=0.957);TUNEL结果显示,S4 siRNA转染组出现明显的凋亡现象,且呈浓度依赖性(r=0.932)。结论PLK1基因在甲状腺未分化癌细胞增殖中具有重要的调控作用。PLK1 siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖,诱导凋亡是其重要机制之一。
 
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