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吉西他滨诱导胰腺癌细胞PANC-1中甲基化诱导静止基因的表达与半胱氨酸天冬氨酸酶-1、核转录因子活性的研究

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的检测吉西他滨(gemeitabine,GEM)诱导胰腺癌细胞株PANC-1中甲基化诱导静止基因(TMSl/ASC)的表达,并探讨半胱氨酸天冬氨酸酶-1(cysteine aspartase,cas
  • 【题 名】吉西他滨诱导胰腺癌细胞PANC-1中甲基化诱导静止基因的表达与半胱氨酸天冬氨酸酶-1、核转录因子活性的研究
  • 【作 者】薛晓婕 汪宏良 罗鹏程
  • 【机 构】湖北省黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)检验科、肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室 湖北省黄石市肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室
  • 【刊 名】《中华内分泌外科杂志》2013年 第3期 180-183页 共4页
  • 【关键词】胰腺肿瘤 TMSl ASC caspase-1 NF―κB 吉西他滨
  • 【文 摘】目的检测吉西他滨(gemeitabine,GEM)诱导胰腺癌细胞株PANC-1中甲基化诱导静止基因(TMSl/ASC)的表达,并探讨半胱氨酸天冬氨酸酶-1(cysteine aspartase,caspase-1)、核转录因子(nuclear factor―κB,NF―κB)的活性与TMSl/ASC之间的关系。方法用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTr)比色法检测GEM在不同浓度(1、2、4、8、16μg/m1)及不同时间(24、48h)下对胰腺癌细胞PANC-1存活率的影响;RT―PCR技术检测PANC―1细胞在GEM(4.27μg/m1)刺激组(实验组)和空白组(对照组)培养24h和48h后TMS1/ASCmRNA的表达情况。用抗KB抑制蛋白(inhibitory protein of NF―κB,IKBR)多克隆抗体、抗caspase-1多克隆抗体和内参β―actin单克隆抗体通过Western blot技术检测并比较IKBa和caspase-1在实验组和对照组中的蛋白表达水平,从而分析NF.KB和caspase-1的活化状态。结果GEM对PANC-1细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率(IC50)为24h4.27μg/ml;24h时实验组和对照组TMSl/ASC的表达量分别为(0.3±0.004)和(0.1±0.001),48h实验组和对照组分别为(0.63±0.007)和(0.21±0.006),2组相比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。Westernblot结果显示:随着培养时间延长,caspase-1在对照组中未发生活化,GEM可促进其活化;GEM实验组与对照组相比It(Bet的表达量无明显变化,GEM不能促使NF―KB活化。结论GEM能抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖并促进凋亡,随着作用时间的延长其药物敏感性减低。GEM作用-定时间可诱导TMS1/ASC表达增加,caspase-1可能参与GEM诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的信号转导途径,NF-κB不参与GEM诱导胰腺癌细胞株PANC―1凋亡的信号转导途径。
 
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