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胶质细胞源性神经营养因子对体外培养小鼠精原干细胞增殖分化作用的影响

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对体外培养小鼠精原干细胞(SSC)增殖与分化的影响。方法雄性昆明小鼠80只。采用Percoll密度梯度分离及差速贴壁法纯化SSC,免疫荧光染色及流式细胞检测
  • 【题 名】胶质细胞源性神经营养因子对体外培养小鼠精原干细胞增殖分化作用的影响
  • 【作 者】胡建新 孙兆林 何坚 梁韵峰 张勇 谭宗建 袁军 梁文通 张红云
  • 【机 构】贵州省人医院泌尿外科 贵阳550002 贵州省人医院生殖中心 贵阳550002 贵州省人医院中心实验室 贵阳550002
  • 【刊 名】《中华泌尿外科杂志》2010年 第4期 227-230页 共4页
  • 【关键词】精原细胞 胶质细胞源性神经营养因子 细胞培养 小鼠
  • 【文 摘】目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对体外培养小鼠精原干细胞(SSC)增殖与分化的影响。方法雄性昆明小鼠80只。采用Percoll密度梯度分离及差速贴壁法纯化SSC,免疫荧光染色及流式细胞检测方法鉴定。将获取的SSC随机分为实验组和对照组,以支持细胞作为饲养层培养SSC,实验组每5mlDMEM/F12完全培养液中添加0.02μgGDNF。酶联仪检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞生长周期;采用卵泡浆内显微注射(ICSI)技术将精子细胞与卵母细胞结合,观察卵裂细胞数,体外培养3d后行染色体数量分析。结果添加GDNF培养的SSC第6、9、12、15天吸光度(A)值分别为0.448±0.028、0.502±0.062、0.556±0.045、0.621±0.072,与对照组0.377±0.053、0.402±0.071、0.432±0.019、0.461±0.037比较差异有统计学意义(P〈0.05);第3、6、9、12、15天SSC DNA合成期(S期)含量分别为20.86、26.34、31.23、37.54、28.02,与对照组1.69、1.73、2.56、4.85、1.82比较差异均有统计学意义(P〈0.05);精子细胞与卵母细胞结合后可得到含有20对染色体的配子。结论ICSI技术可为鉴定SSC体外分化为精子细胞提供较充分的依据;GDNF能促进SSC的体外增殖与分化。
 
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