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人前脑啡肽原基因修饰人骨髓间充质干细胞系的构建

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:7
摘 要:目的 构建人前脑啡肽原(PENK)基因修饰的并可稳定分泌脑啡肽蛋白的人骨髓间充质干细胞系(hMSCs).方法 采用脂质体法将PENK基因逆转录病毒载体质粒(pBABE-PENK)转染至Phoenix-
  • 【题 名】人前脑啡肽原基因修饰人骨髓间充质干细胞系的构建
  • 【作 者】蔡少彦 孙怡 赵国栋
  • 【机 构】广东省人民医院麻醉科广东省医学科学院 广州市510080
  • 【刊 名】《中华麻醉学杂志》2010年 第5期 565-568页 共4页
  • 【关键词】脑啡肽类 生物,基因修饰 干细胞 骨髓
  • 【文 摘】目的 构建人前脑啡肽原(PENK)基因修饰的并可稳定分泌脑啡肽蛋白的人骨髓间充质干细胞系(hMSCs).方法 采用脂质体法将PENK基因逆转录病毒载体质粒(pBABE-PENK)转染至Phoenix-293T细胞,收集病毒上清液感染hMSCs细胞,经过嘌呤霉素筛选得到稳定表达PENK基因的hMSCs细胞株(hMSC-PENK细胞).以转染空载体细胞作为对照,即hMSC-pBABE细胞.采用RT-PCR法检测PENK mRNA的表达,免疫荧光法测定亮氨酸脑啡肽(LEK)的表达,ELISA法测定细胞培养上清液LEK浓度.结果 与hMSCs细胞和hMSC-pBABE细胞比较,hMSC-PENK细胞PENK mRNA和LEK表达上调,细胞培养上清液中LEK浓度升高(P<0.05或0.01).结论 PENK基因修饰的hMSCs可表达PENK基因并分泌脑啡肽蛋白,成功构建了稳定分泌镇痛物质的细胞系.
 
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  • (1) 脑啡肽类,生物,基因修饰,干细胞,骨髓
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