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重组抗基因RNA与铁蛋白基因双启动子慢病毒表达载体的构建

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:8
摘 要:目的构建共表达抗基因RNA与铁蛋白基因的双启动子慢病毒载体。方法将铁蛋白重链基因构建人线性化的慢病毒载体pGC-FU,以获得中间质粒DGC-U-HF;进而将具有基因沉默效应的β-arrestin2抗基
  • 【题 名】重组抗基因RNA与铁蛋白基因双启动子慢病毒表达载体的构建
  • 【作 者】高峰 温晓岩 刘希江 卜慧莲 曹菲 田学愎 杨辉 王鹏 田玉科
  • 【机 构】华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室
  • 【刊 名】《中华麻醉学杂志》2011年 第9期 1096-1098页 共3页
  • 【关键词】RNA 铁蛋白质类 慢病毒属
  • 【文 摘】目的构建共表达抗基因RNA与铁蛋白基因的双启动子慢病毒载体。方法将铁蛋白重链基因构建人线性化的慢病毒载体pGC-FU,以获得中间质粒DGC-U-HF;进而将具有基因沉默效应的β-arrestin2抗基因RNA构建人中间质粒,以获得目的质粒pGC-agRNA-HF;通过病毒的包装和浓缩,应用RealtimePCR法检测重组慢病毒的滴度,应用NGl08-15细胞,采用Western blot和实时定量PCR检测抗基因RNA的基因沉默效应和铁蛋白的表达。结果抗基因RNA与铁蛋白均成功构建入慢病毒表达载体,病毒滴度2.00×109TU/ml,该病毒转染NGl08.15细胞后,β-arrestin2表达下调,铁蛋白表达上调。结论成功构建了表达抗基因RNA与铁蛋白基因的双启动子慢病毒载体。
 
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